分光光度計(jì)主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測(cè)系統(tǒng)組成。光源發(fā)出的復(fù)合光通過(guò)單色器被分解成單色光，當(dāng)單色光通過(guò)樣品室時(shí)，一部分被樣品吸收，其余未被吸收的光到達(dá)檢測(cè)器，被轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)，經(jīng)電子電路的放大和數(shù)據(jù)處理后。通過(guò)顯示系統(tǒng)給出測(cè)量結(jié)果。
 

　　分光光度計(jì)的信號(hào)部分可能出現(xiàn)的幾種狀況：
 

　　(1)故障：吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值;
 

　　原因：沒(méi)做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液;
 

　　檢查：將參比液與樣品液調(diào)換位置便知;
 

　　處置：做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液;
 

　　(2)故障：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，全波長(zhǎng)范圍內(nèi)基線噪聲大;
 

　　原因：光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品;
 

　　檢查：觀察光源是否照射到入射狹縫的中央?石英窗上有無(wú)污染物?
 

　　處置：重新調(diào)整光源鏡的位置，用乙醇清洗石英窗;
 

　　(3)故障：信號(hào)的分辨率不夠，具體表現(xiàn)是：本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無(wú)法觀察到;
 

　　原因：狹縫設(shè)置過(guò)窄而掃描速度過(guò)快，造成檢測(cè)器響應(yīng)速度跟不上，從而失去應(yīng)測(cè)到的信號(hào);按常理，一定的狹縫寬度要對(duì)應(yīng)一定范圍的掃描速度;或者狹縫設(shè)置得過(guò)寬，使儀器的分辨率下降，將小峰融合在大峰里了。
 

　　檢查：放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄;
 

　　處置：將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數(shù)三者擬合成一個(gè)優(yōu)化的條件;
 

　　(4)故障：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，僅僅是紫外區(qū)的基線噪聲大;
 

　　原因：氘燈老化、光學(xué)系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結(jié)晶物;
 

　　檢查：可見(jiàn)區(qū)的基線較為平坦，斷電后打開(kāi)儀器的單色器及上蓋，肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面;如果光學(xué)系統(tǒng)正常，較大的可能是氘燈老化，可以通過(guò)能量檢查或更換新燈方法加以判斷;
 

　　處置：更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意：此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗(yàn)者來(lái)實(shí)施);
 

　　處置：清洗比色皿，更換空白溶液;
 

　　(5)故障：樣品出峰位置不對(duì);
 

　　原因：波長(zhǎng)傳動(dòng)機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移;
 

　　檢查：通過(guò)氘燈的656.1nm的特征譜線來(lái)判斷波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確;
 

　　處置：對(duì)于儀器而言處理手段相對(duì)簡(jiǎn)單，使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可;而對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的儀器，這種調(diào)整則需要專業(yè)人員來(lái)進(jìn)行了;
 

　　(6)故障：樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良;
 

　　原因：排除儀器本身的原因外，較大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡(jiǎn)易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上;
 

　　檢查：更換一種穩(wěn)定的試樣判定;
 

　　處置：采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠;
 

　　(7)故障：做基線掃描或樣品掃描時(shí)，基線或信號(hào)有一個(gè)大的負(fù)脈沖;
 

　　原因：掃描速度設(shè)置得過(guò)快，信號(hào)在讀取時(shí)，誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號(hào)讀取了;
 

　　(8)故障：沒(méi)有任何檢測(cè)信號(hào)輸出;
 

　　原因：沒(méi)有任何光束照射到樣品室內(nèi);
 

　　檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為530nm，狹縫盡量開(kāi)到較寬檔位，在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處，觀察白紙上有無(wú)綠光斑影像;
 

　　處置：檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位?雙光束儀器的切光電機(jī)是否轉(zhuǎn)動(dòng)了(耳朵可以聽(tīng)見(jiàn)電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)的聲音)?
 

　　檢查：改變掃描速度;
 

　　(9)故障：做基線掃描或樣品掃描時(shí)，基線或信號(hào)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿屏大噪聲;
 

　　原因：濾光片飼服電機(jī)“失步”，造成檔位錯(cuò)位，國(guó)產(chǎn)電機(jī)尤甚;
 

　　檢查：重新開(kāi)機(jī)有可能回復(fù)，或打開(kāi)單色器對(duì)照波長(zhǎng)與濾光片的相對(duì)位置來(lái)檢查(注意：打開(kāi)單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激);
 

　　(10)故障：當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí)，吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)，特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開(kāi)關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器;
 

　　原因：開(kāi)關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良;
 

　　檢查：用手加重力量按琴鍵時(shí)，吸光值隨之變化;
 

　　處置：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可;
 

　　處置：更換飼服電機(jī);
 

　　(11)故障：樣品室放入空白后做基線記憶，噪聲較大，紫外區(qū)尤甚;
 

　　原因：比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對(duì)紫外光譜的吸收太強(qiáng)烈，使放大器超出了校正范圍;
 

　　檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為250nm，先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零，然后將空比色皿插入樣品道一側(cè)，此時(shí)吸光值應(yīng)小于0.07Abs;如果大于此值，有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿;同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大小;
 

　　(12)故障：儀器零點(diǎn)飄忽不定，主要反映在簡(jiǎn)易儀器上;
 

　　原因：在簡(jiǎn)易儀器中，零點(diǎn)往往是通過(guò)電位器來(lái)調(diào)整，這種電位器一般是炭膜電阻制作的，使用久了往往造成接觸不良;
 

　　處置：更換電位器。